血细胞分析仪原理及散点图临床应用PPT课件

血细胞分析仪原理及散点图 临床应用 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 二、散点图案例分析 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直 方图，DIFF散点图， NRBC散点图等。实验人员可根据这些信息从大 量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认，提高工作效率 ，减少漏诊率。 主要原理 DIFF WBC/BASO NRBC 半导体激光 荧光染色（聚次甲基+噁嗪 ） FSC前向散射光：细胞大小 SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息） SFL侧向荧光：核酸含量（DNA 、RNA) DIFF通道分析原理 4DL(阴离子表面活性剂） 完全溶解RBC PLT 在WBC膜上打孔 4DS 对核酸染色 纵坐标：侧向荧光（SFL） 反映核酸含量 横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内部复杂程度 溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在 SSC显示复杂程度是最大的。 化学粘附 嗜酸粒细胞 大分子有机酸 大分子有机酸与嗜酸 粒细胞 中的碱性颗粒 发生化学粘附 RNA/DNA荧光染色原理 成熟白细胞：高荧光特性 网织红细胞：弱荧光特性 血小板： 微弱荧光特性 成熟RBC： 无荧光特性 原始细胞： 极高荧光特性 幼稚细胞： 极高荧光特性 荧光染色WBC分类的优势 检测异常细胞 提供幼稚粒细胞信息（IG） 提供原始细胞信息（Other） WBC/BASO 通道分析原理 S–FB溶血剂 （酸性，低渗） 溶解RBC PLT 除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态 Baso保持原状 嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液， Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该 溶液中受到保护，而其他有核细胞则被 溶解成 裸核 纵坐标：前向散射光（FSC） 反 映细胞大小 横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内部复杂程度 NRBC通道分析原理 NR溶血剂 完全溶解RBC，PLT WBC保持原状 NRBC溶解为裸核 NR染液对核酸染色 纵坐标：前向散射光（FSC） 反映细胞大小 横坐标：侧向荧光（SFL） 反映核酸含量 NRBC% = NRBC# / NRBC_WBC# 出现有核红时 红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在WBC 计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。 WBC的修正 WBC增多对RBC计数的干扰 RBC：阻抗法RBC值含WBC WBC>100*109/L时，需校正红系统参数 贫血越严重，对RBC影响越大 血红蛋白通道 光电比色法 SLS（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒 二、散点图案例分析 嗜碱性粒细胞增多症 在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外 DIFF散点图上，中性区域 的左下方也为嗜碱区域， 也出 现了大量的散点。 BASO%：仪器13.4% 镜检13.5% AML-M1(例1) 不可信 DIFF散点图显示淋巴与单核之 间 融合，有分类结果，但不可 信。 IMI散点图也提示大量原始细 胞 。 镜检发现有77.5%的原始细胞。 细胞表面标志CD13和CD33阳 性 ，CD36阴性；为急性髓细 胞性白 血病。 AML-M2 DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。 IMI散点图显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。 NRBC散点图：红色散点 镜检发现有90%的原始细胞、3% 的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞 。 流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性，为髓 细胞性白血病。 AML-M3 DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。 IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。 NRBC散点图：红色散点 镜检发现3%的原始细胞，91%的早幼粒 细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼 粒细胞。 AML-M4 DIFF散点图，白细胞区域出现大量 灰白色散点，完全融合，不分类。 大 致分成两群，一群为原始细胞， 一 群为幼稚粒细胞。 IMI散点图也显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。 AML-M5b DIFF散点图淋巴与单核 融 为一体，不分类，IMI 散点图显示大量原始细胞 和幼 稚粒细胞。 镜检发现59%的原始细胞， 0.5%的早幼粒细胞，单 核细 胞24.5%。 慢粒危象 DIFF散点图OTHER区域出现大 量散点，中性粒细胞上方也有少 量散点，IMI散点图也出现大量 红色散点，仪器报警提示有大量 原 始细胞和幼稚粒细胞。 NRBC散点图：红色散点 镜检发现38.5%的原始细胞，幼 稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯 酶染色阴性或弱阳性，可被氟化 钠抑制。这是一例慢粒急单变。 MDS DIFF：淋巴细胞和单核细胞 之间界限不清，提示出现原 始 细胞。中性粒细胞散点向 左下方延伸到嗜碱区域。 IMI：少量红点 NRBC：幼红 镜检：原始：1%，BASO： 5%，NRBC：2.5/100WBC MDS急淋变 范**，女，67y。2016.11，诊 断为MDS伴原始细胞增 多（10% ） DIFF散点图淋巴与单核区域融 合，提示出现原始细胞 报警提示异常淋巴细胞/原始细 胞，异淋？ 镜检：47%原始淋巴细胞，未见 异淋。血片POX（-） 。 2018.4.MDS急淋变 急性T淋巴细胞白血病 DIFF散点图淋巴与单核完 全融 合，IMI散点图几乎没 有红色散点，仪器提示异 常淋巴/ 原始淋巴细胞。 镜检发现有59.5%的异常淋 巴 细胞。 本例被诊为ATL。 CLL 淋巴与单核区域分界不 清，仪 器提示淋巴细胞 增多/原始淋巴。 镜检：L：86.5%，幼淋 2.0% 异型淋巴细胞 异型淋巴细胞增高与 多种病毒 感染及变态 反应有关。 常见有：传染性单核 细胞增多 症、病毒性 肺炎、病毒性肝炎 、 肾综合征出血热等病 毒性 感染。 特点：胞体增大，胞 质增多、 嗜碱性增强 ，细胞核母细胞化， 荧光强度最 强。 疟原虫感染的散点图（一） 散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。 原因：疟原虫裂殖体破裂，疟色素从感染的血细胞中释放出来，继而被白细胞吞噬，吞噬 了疟色素的白细胞侧 向散射光强度改变，显示在散点图靠近中性粒细胞一侧，但也被仪器 以Eo特有的红色标示出来。 张时民等.血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例.中华临床医师杂志，2011,5（2）:633-635 疟原虫感染的散点图（二） 从仪器报警EO增高或无EO分类结果的1 501份标本中发现有9份疟 原虫标本，6份散点图 表现为EO与NEG之间间距缩小(图1) ，3份报警白细胞散 点图异常,且散点图显示EO与NEG之 间无间距(图2)。 其他1 492份散点图基本正常。因为是真性EO增多，表现在散点图上是EO 数量增加， 为正常分类散点图(图3)。 戴燕，万海英等. XE-2100血细胞分析仪嗜酸粒细胞异常散点图报警筛选疟原虫感染的研究.中华检验医学杂志，2008,31 （7）:763-766 谢谢大家聆听！