糖化血红蛋白检测方法的标准化PPT课件

糖化血红蛋白检 测方法的标准化 主讲人：xxx 01 HbA1c常规 测定方法 02 HbA1c检测 的标a准化 03 HbA1c检测 的规范化 糖化血红蛋白的发现过程 67岁女性严重糖尿 病病史 血糖控制不住 Add Yur Title 电泳产物中存在 异常的快速Hb 对47例糖尿病患 者进行了三个月 的研究 Add Your Title HbA1c结构相同 糖化和非糖化的血红蛋白 地中海贫血的病人， HbF的含量升高， 而HbA1c降低；这 Hb 种情况应该检测总 的糖化血红蛋白。 HbA ααββ 97% HbA2 ααγγ 2.5% HbF ααγγ 0.5% 非糖化 HbA0 94% A1a和A1b浓度 非常低 HbA1a HbA1 6% HbA1b 糖化 HbA1c 5% 主要的糖化 血红蛋白 已使用>20年 根据DCCT研 究确认  血糖是通过弥散方式进入细胞内的，无需胰岛素参与。血糖与血红 蛋白的结合过程很缓慢，而且是不可逆的，故体内衰老红细胞比新 生红细胞的糖化HbA1c含量约高出1.5倍。 HbA1c是血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物 HbA1c越高表示血糖与血红蛋白结合越多，糖尿病病情也越重 HbA1c监测已作为糖尿病疗效判定和调整治疗方案的“金指标”  HbA1c水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时间， 病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关，是判定糖尿病长期控制 的良好指标 HbA1c在患有各种贫血，出血性疾病或应用心得安，吗啡等药物时可降 低，而在服用大量阿司匹林，维生素C或肾功能不全时可增高 HBA1c形成的动力学 寿命：120days 50%的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关 40%的HbA1c值与过去31--90天平均血糖水平相关 只有10%HbA1c与过去91--120天平均血糖水平相关 ADA(美国糖尿病学会）对HbA1c的定义 1.HbA1c对糖尿病的重大影响相当于胰岛素的问世 2.HbA1c是监测糖尿病血糖控制的金标准 3.所有的糖尿病人均应常规的测定HbA1c 4.对于血糖控制稳定者每年至少测定两次 5.对治疗方案变动者或血糖未达标者，则需季度监测 6.HbA1c的达标值ADA为<7%，IDF(国际糖尿病联盟)西太区标准<6.5% 糖尿病监测指标及其变迁 监测指标：尿糖，血糖，糖化血清蛋白及糖化血清白蛋白，糖化血红蛋白 1975年以前 尿糖，酮体 随机血糖 指导治疗以缓 解高血糖症状 检测技术进步 证据积累：糖 尿病慢性并发 症是慢性高血 糖的结果 上世纪80年代 尿糖被毛细血管 血糖检测取代 糖化血红蛋白成 为常规监测的重 要部分 糖尿病检查的项目选择 时间 是否空腹 尿糖 几小时后 否 随机血糖 取样时 否 空腹血糖 取样时 是 OGTT 糖化血清蛋白 取样时 1-3周 第一次是 第二次否 否 糖化白蛋白 2-3周 否 糖化血红蛋白 1-2个月 否 抗凝剂的选择 无 草酸碱/氯化钠 草酸碱/氯化钠 草酸碱/氯化钠 无 无 EDTA,肝素 草酸碱/氯化钠 样本稳定 几小时 几小时 几小时 几小时 几天 几天 两周以上 重复性 差 差 差 差 可以 可以 很好 诊断标准的变迁： 1985年WHO的糖尿病诊断标准 符合下列之一者可诊断为糖尿病 有典型的糖尿病症状，任意时间血糖≥11.1mol/l 1 （200㎎/dl) FPG(空腹血浆葡萄糖水平)两次或两次以上 2 ≥7.8mol/l（140㎎/dl) FPG＜7.8mol/l（140㎎/dl)而怀疑为糖尿病者， 3 OGTT 2h PG(血糖）≥11.1mol/l（200㎎/dl) 注：若无糖尿病症状，尚需另有一次血糖超过11.1mol/l（200㎎/dl) 国际专家委员会建议的HbA1c诊断糖尿病的切点 HbA1c≥6.5%作为诊断非妊娠相关的糖尿病的切点 将HbA1c在≥6.0%和≤6.5%范围内的个体定义为“高危的 亚糖尿病状态” 诊断糖尿病的切点 2009年美国糖尿病协会在糖尿病治疗指南中将HbA1c列为糖尿病 的首选诊断标准。 HbA1c的常规测定方法 HbA1c常规测定方法： 各种糖化血 红蛋白的测 定方法 基于电位变化的物 理方法 基于胶乳颗粒凝集 的抑制作用 基于化学原理的方 法 阳离子交换树脂微 柱层析法 高压液相法 琼脂凝胶电泳法 免疫凝集抑制法 TBA比色法 亲和色谱微柱法 （本科所采用的方 法） HbA1c常规测定方法： 1.阳离子交换树脂微柱层析法 优点 价廉，操作快速 缺点 易受以下多种因素的干扰 不稳定型HbA1HbF温度 综上表明：阳离子交换树脂法测定GHB不是一种精确，可靠，重复性强，灵敏度搞的检测方法。 用作要求不太高的衡量糖尿病长期控制水平的监测指标，尚可勉强采用，而作为要求精确程 度高的科研手段是困难的 高压液相法（HPLC） 是目前各种GHB测定方法中高效，精确的方法之一 此种虽属理想的方法，但仪器价格十分昂贵，仅在一些发达国 家使用 HbA1c常规测定方法： 亲和色谱微柱法 自1981年问世以来，很快受到学者们的重视，作为糖尿 病理想的检测手段已获公认。 原理：将血滴入反应试剂时，血红细胞被立刻溶解， 所有血红蛋白随机被沉淀。硼酸结合物即可与糖化血 红蛋白的顺式-二醇基结合。将反应物置于检测设备 上，所有已沉淀的血红蛋白无论是否与硼酸结合，都 将残留于滤网上，使用清洗液，出去多余有色结合物。 最后使用NycoCard READERII检测仪对蓝色和红色的 色谱进行分析。 HbA1c常规测定方法： Mission 亲和色谱微柱法 操作简单，快速，价廉。据报道EDTA抗凝血标本在20-24℃下可保存三周， 优点 其GHB值仍与第一天同一血标本值无差异。 缺点 不能测试GHB的单一组分，且包含HbA1c的糖化组分，但并不影响它作为可 靠地糖代谢指标的价值。 HbA1c检测的标准化 HbA1c常规测定方法： HbA1c标准化 国家，地区标准化（National)：美国，瑞典及日本 国际标准化（International)；国际临床化学与医学实验室联盟 （IFCC) HbA1c检测的标准化： 美国病理学会（CAP)PT调查 实验室采用HbA1c报告结果 实验室采用NGSP(美国糖化血红蛋白标准化计划）认可的方法 采用NGSP认可的方法，检测均值与NGSP的HbA1c靶值的差异分别为0.3% （低值），0.4%（中值），0.5%（高值） >95%实验室方法之间的差异≤0.5% 可接受标准为NGSP靶值±10%，而不再考虑不同方法组的均值 总的符合率为95.2%--97.1% HbA1c检测的标准化： 中国糖化血红蛋白教育计划于2010年3月20日正式启动 主要目标是以循证医学为依据，促进糖化血红蛋白在我国糖尿病管理 中的广泛和正确使用，加速糖化血红蛋白检测方法的标准化进程，开 展与糖化血红蛋白应用相关的研究工作 HbA1c检测的规范化 仪器的选择----厂家通过NGSP,IFCC认证 HbA1c检测的规范化： 规范化HbA1c检测 - -使-用-经-过保NGSP证认证的检方法测质量 加强实验室质量管理---制定实验室管理文件 （室内质控） 参加室间质评 生产厂家----提高出厂方法质量 HbA1c检测的规范化： 管理文件的基本内容 人员要求 质量控制要求 操作规程 样本 结果报告 仪器和试剂 实验室生物安全 实验室记录的保存 结语 建立参考方法，制备参考物质，建成参考实验室网络，是实现我国的糖化血红蛋白检测溯 源性的必由之路，对临床实验室之间的检测结果的准确性和可比性意义重大。希望通过 “中国糖化血红蛋白教育计划”推动HbA1c标准化和质量管理的进一步深入开展，为糖尿病 筛选，诊断，血糖控制，疗效观察提高准确，有效的检测结果，从而更好地服务于临床医 生和糖尿病患者 糖化血红蛋白检 测方法的标准化 主讲人：xxx